紫外可見光分光度計是一種分析儀器,用于測量樣品在紫外和可見光譜區域內對光的吸收情況。它的工作原理基于分子對特定波長光的選擇性吸收。下面將詳細介紹紫外可見光分光度計的工作原理:
1、光源:通常使用一種可以發射連續光譜的光源,比如氘燈(產生紫外光譜)和鎢燈(產生可見光譜)。有些儀器會使用單一光源并通過分光器將光分成紫外和可見光兩部分。光源發出的光需要是穩定且強度高的,以便于獲得準確的測量結果。
2、單色器:由于光源發出的是連續光譜,包含了多種波長的光,因此需要通過單色器來選取所需的單一波長。單色器一般由入射狹縫、準直鏡、光柵或棱鏡以及出射狹縫組成。光經過入射狹縫后被準直鏡反射成平行光線,再通過光柵或棱鏡進行分光,使不同波長的光被分散開來。通過旋轉光柵或棱鏡可以選擇特定的波長通過出射狹縫,從而得到純色的單波長光束。
3、樣品室:單色光隨后會照射到裝有樣品的樣品室。在紫外可見光分光度計中,樣品通常放在透明的比色皿中,光束穿過比色皿中的樣品。樣品中的溶解物質會吸收特定波長的光,而不同物質具有不同的吸收特性。
4、檢測器:穿過樣品后的光會被檢測器捕捉,檢測器通常是光電傳感器,如光電二極管或光電倍增管。檢測器的作用是將光信號轉換為電信號。
5、數據處理:檢測器產生的電信號隨后被發送到數據處理系統。在這里,電信號被轉換成吸光度值,該值與樣品中物質的濃度有關。根據比爾-朗伯定律,溶液的吸光度與溶液中溶質的濃度成正比,這也意味著,通過測量未知樣品的吸光度,可以計算出溶液中特定成分的濃度。
紫外可見光分光度計因其高靈敏度和簡單易用的特性,被廣泛應用于化學、生物學、藥學和環境科學等領域的定性及定量分析。