由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,根據(jù)這一特性,可對物質(zhì)進(jìn)行定性分析。由于物質(zhì)濃度的不同,吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度也不相同,從而通過對物質(zhì)吸光度或透過率的測量判定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ),也是美析儀器紫外可見分光光度計的工作原理。
紫外分光光度計的用途:
一、鑒定物質(zhì)。用來測量待測物質(zhì)對可見光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器,稱為可見分光光度計;紫外可見分光光度計用來測量待測物質(zhì)對可見光或紫外光(200~760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測定核酸和蛋白的濃度,也可以測定細(xì)菌細(xì)胞密度。
二、分光光度計的用途之二待測物質(zhì)是標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對照進(jìn)行分析。
三、分光光度計的用途之三是比較最大吸收波長吸收系數(shù)的一致性。
四、分光光度計的用途之四是物質(zhì)的純度檢驗。
五、分光光度計的用途之五是推測化合物的分子結(jié)構(gòu)及構(gòu)成。
六、分光光度計的用途之六是判定絡(luò)合物的組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定。