紫外分光光度計有關(guān)測量條件的討論
發(fā)布日期:2017-05-12 瀏覽次數(shù):1259
紫外分光光度計采用雙光束光學(xué)系統(tǒng),成功實(shí)現(xiàn)了高精度和高可靠性測量的結(jié)合,可滿足各種應(yīng)用的要求,可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學(xué)研究、環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、衛(wèi)生防疫等領(lǐng)域。
紫外分光光度計改良優(yōu)化的光路設(shè)計、進(jìn)口光源和接收器造就了系統(tǒng)高性能和高可靠性;它還擁有豐富的測量方法,具有波長掃描、時間掃描、多波長測定、多階導(dǎo)數(shù)測定、雙波長、三波長DNA蛋白質(zhì)測量等多種測量方法,可滿足不同測量的要求。
紫外分光光度計測定除需從試樣的角度選擇合適的顯色反應(yīng)和顯色條件外,還需從紫外分光光度計的角度選擇適宜的測定條件保證測定結(jié)果的準(zhǔn)確度。
1.入射光波長的選擇:在大吸收波長處測定吸光度不僅能獲得高的靈敏度,而且還能減少由非單色光引起的對朗伯-比爾定律的偏離。因此在紫外分光光度計的分光光度法測定中一般選擇大吸收波長為入射波長。
2.參比溶液的選擇:在實(shí)驗(yàn)中,要選擇合適的空白溶液作為參比溶液來調(diào)節(jié)紫外分光光度計的零點(diǎn),以便消除顯色溶液中其他有色物質(zhì)的干擾,抵消吸收池和試劑對入射光的影響。根據(jù)試樣溶液的性質(zhì),選擇合適組分的參比溶液很重要。
3.吸光度范圍選擇與控制:任何紫外分光光度計都有一定的測量誤差,測量誤差的來源主要是光源的發(fā)光強(qiáng)度不穩(wěn)定法,光電效應(yīng)的非線性,電位計的非線性,雜散光的影響,單色器的光不純等因素,對于一臺固定的紫外分光光度計來說,以上因素都是固定的,也就是說它的誤差具有一定穩(wěn)定性。
4.比色皿的使用:選擇適宜規(guī)格的比色皿。同一實(shí)驗(yàn)使用同一規(guī)格的同一套比色皿,以減少測量誤差,所以用普通分光光度法不適用于高含量或極低含量物質(zhì)的測定。
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